动物造模——脑缺血再灌注模型SOP

一、目的：

建立实验室动物建模的标准操作规程。

二、适用范围：

本SOP适应于本公司实验室动物实验所有工作人员。

三、主体内容：

1.实验动物：取适应性饲养一周的健康SD大鼠，雌雄均可

2.术前器械及物品准备（所有物品消毒备用）

1）干棉球，酒精棉球

2) 碘伏＋棉签

3）10％水合氯醛＋注射器

4) 常规手术器械

5) 显微手术器械

6）缝合包

7）体视镜

8）外购的MCAO线拴

3.麻醉：腹腔注射10%水合氯醛

4.麻醉后将大鼠以仰卧位固定在解剖板上，颈部去皮，消毒

5.沿颈部正中切开皮肤。

6.钝性分离皮下组织，在分离过程中会看到颌下腺，将腺体轻轻推到一侧，分离到气管前肌后，沿右侧胸锁乳突肌腱向下分离，见到颈动脉鞘后可用拉钩将皮肤肌肉固定好。

7.此时可见到颈总动脉，小心向头侧跟心侧剥离颈动脉跟其随行的神经。剥离到头侧约0.5cm时可以看到颈总动脉分成颈内动脉跟颈外动脉，继续剥离2根血管跟神经，此时用准备好的丝线结扎颈总动脉，另外一根套在上面轻轻打一个活结备用，结扎颈外动脉，用血管夹夹闭颈内动脉。

8.将老鼠手术部位移至体视镜下，用显微剪在颈总动脉上斜行剪一个小口，用显微镊夹起MCAO线拴从血管上的小口穿入血管，穿到分叉处时轻轻提起结扎颈总动脉的丝线，此时颈总动脉跟颈内动脉会在一条直线上，线拴就很容易进入到颈内动脉，待线拴进入到血管夹的位置时，稍微拉紧之前打活结的丝线，松开血管夹，继续向里面推送线拴，直到线拴上标记物到达血管分叉的位置。拉紧活结。

9.缝合肌肉跟皮肤（一针）。

10.手术完成后放回笼舍中，注意保暖。

11.验证：术后24小时，小心拔出线拴，灌注2小时取脑做TTC染色。