分子实验——克隆载体构建 实验介绍 构建克隆载体是指利用已有的载体,通过特定的技术手段将目标基因序列导入载体上,以便进一步研究。目前成品的载体很多,目的各不相同,有简单的中间TA载体,也有表达到动物、...
CRISPR/Cas9编辑载体技术
1、服务介绍:CRISPR/Cas9系统是当前最流行的基因编辑系统。该系统可用于各种复杂基因组的编辑,实现对特定DNA片段的敲除、嵌入,包括基因定点突变或整合、多位点突变和基因组片段的缺失等。相较于“...
腺病毒包装
实验简介 腺病毒是一种无包膜的线状双链DNA病毒。除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞,腺病毒系统可以在任何哺乳动物细胞中高效瞬时表达。感染宿主细胞时,病毒基因组及其携带的外源基因独立于宿主基因组外游离表...
噬菌体展示技术简介
噬菌体展示技术(phage display technology)的本质是一种筛选技术。将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中,随着噬菌体的传代,外源蛋白会展现在噬菌体表面,形成噬菌体文库。随后用特定蛋...
荧光素酶报告基因检测问题解答
一、荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途? a.启动子结构分析,将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体,检测其启动子活性。 b.启动...
CRISPR-Cas9文库筛选技术简介
基于CRISPR的工具彻底改变了靶向与疾病相关的基因突变的能力,如今,CRISPR的工具箱一年比一年更加扩大,作为CRISPR技术的先驱,张锋教授团队在《Science》发表了一篇题为“A cytos...
密码子、mRNA结构及基因表达优化
密码子优化是基因表达优化的关键步骤之一。其中涉及mRNA二级结构、稀有密码子、核糖体结合位点等关键因素。简单说,基因能否顺利表达蛋白与稀有密码子含量、mRNA结构是否阻碍翻译有很大关系。基因表达优化还...
细菌突变体文库构建
一、背景介绍转座子(transposon)是一类可以自主位移并插入宿主基因组中随机位点的移动遗传因子,这种转位特性使它可以直接或间接地造成基因重排,引起基因变异。随着许多微生物基因组全序列的获得,人们...
真菌基因编辑介绍
一、背景介绍:真菌是真核生物中一支庞大而种类繁多的物种,目前已知的约10万多种,自1996年酿酒酵母基因组被测定以来,越来越多的真菌基因组被解析和公布,测序获得大量功能未知的真菌DNA序列,鉴定这些基...
细菌同源重组改造菌株构建
一、背景介绍基因的同源重组是指外源 DNA 与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组,并整合在预定的位置上,从而改变细菌某些遗传特性的方法。细菌中基于同源重组的基因改造技术主要有Red/ET系统...