靶标蛋白表达量检测是转基因作物基因效应评价的重要指标。蛋白检测将针对靶标蛋白进行Western blot分析和ELISA定量分析(ELISA定量分析仅针对Bt蛋白Cry1Ab/1Ac、Cry1C和Cry2A)。
根据客户提供蛋白标签和样品,抽提蛋白后,公司采用常用商业化抗体进行Western杂交(目前可用的标签抗体有his-tag,GST-tag,flag-tag 和MBP-tag)。
根据客户提供样品,抽提蛋白后进行ELISA检测并计算表达量,每个样品测定3个技术重复(目前仅针对Bt蛋白Cry1Ab/1Ac、Cry1C和Cry2A)。
(1)Western blot:提供客户蛋白样品,每步骤实验照片及杂交检测X-光片。
上图为Western blot结果(抗体为GST抗体),下图为总可溶蛋白丽春红染色结果
(2)ELISA蛋白定量:提供酶标仪检测的原始数据及数据分析、结果判定。
ELISA标准曲线(横坐标为标样浓度ppm,纵坐标为吸收值)
客户提供足量原始样品和一抗;如选用标签抗体(his-tag,GST-tag,flag-tag 和MBP-tag)由本公司提供一抗。
服务周期为12个工作日,标准服务为5个样品(包括一个阳性标签对照)。
- 本文由 martin 发表于 2025年3月20日 11:07:48
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