细菌同源重组改造菌株构建

2025年3月20日 11:34:35载体构建行业资料动物和细胞服务评论25阅读模式

一、背景介绍

基因的同源重组是指外源 DNA 与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组，并整合在预定的位置上，从而改变细菌某些遗传特性的方法。细菌中基于同源重组的基因改造技术主要有Red/ET系统同源重组法、基于自杀载体的同源重组法、基于温敏型质粒的同源重组法。 三种方法各有优缺点，科沿有道生物根据不同细菌自身特点选择不同的同源重组方法，以达到敲除、置换、插入或定点突变等基因组改造的要求。

科沿有道生物拥有丰富的细菌突变体库构建，同源重组及CRISPR基因改造经验，针对每种细菌的不同特性，开发构建同源重组改造体系，对于已经验证的同源重组构建体系，承诺不成功不收费。

二、同源重组改造体系成熟的菌种列表

三、案例展示

四、项目流程

1）项目评估及建立同源重组敲除方案；

2）培养客户提供的菌株，并进行16s测序验证种属；

3）进行药物敏感性筛选，确定筛选标记基因；

4）设计基因两侧同源臂；

5）将抗性标记基因，同源臂构建至同源重组改造质粒系统；

6）制备目标菌株感受态；

7）电击转化；

8）筛选及编辑菌株测序鉴定。