免疫共沉淀（CO-IP）技术服务简介

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法，属于免疫沉淀技术的一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。

免疫共沉淀的设计理念是，假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员，那么利用这种蛋白的特异性抗体，就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来（常说的“pull-down”），进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他未知成员。免疫共沉淀的特点可以概括为两点，第一是天然状态，第二是蛋白复合物。

一、CO-IP优缺点：

优点

缺点

1、相互作用的蛋白处于天然状态，都是经过翻译后修饰的；

2、可以分离得到天然状态下的相互作用蛋白复合物；

3、可以检测体外和细胞内的相互作用。

1、检测不到弱亲和力和瞬时的蛋白相互作用；

2、蛋白的相互作用可能不是两者直接结合，可能存在第三方的桥梁作用；

3、须在实验前预测目的蛋白，以选择最后检测的抗体，否则实验得不到结果；

4、假阳性率较高，试验需要设置正确的对照。

科沿有道提供免疫共沉淀（CO-IP）检测服务。可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证，也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。其实验方法为将靶蛋白（X）与目的蛋白（Y）在同一细胞内孵育，形成“靶蛋白-目的蛋白”复合物。将靶蛋白的特异性抗体与复合物共孵育，形成“抗体-靶蛋白-目的蛋白”复合物，利用Proterin A/G纯化。通过SDS-PAGE银染，结合Western Blot等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。

二、免疫共沉淀技术服务：

服务内容：分子间相互作用检测（CO-IP实验）

交付内容：相互作用分析报告（包括SDS-PAGE结果、WB结果等）

周期：2~4周

三、Co-IP实验流程：

免疫共沉淀实验流程为：收集蛋白样品—诱饵蛋白抗体沉淀诱饵蛋白—SDS-PAGE分离蛋白—WB检测是否存在靶蛋白。

四、样品要求：

4.1蛋白样品

直接提供蛋白样品：动植物组织/器官或含有诱饵蛋白及目标蛋白的裂解液；

提供表达质粒：质粒需测序验证，提供测序峰图，防止基因模板或表达质粒本身碱基突变，造成实验延误；

提供基因序列：客户提供序列，由德泰负责诱饵蛋白或目标蛋白的表达。

4.2检测抗体

客户提供：用于免疫检测的抗体>20ul；

科沿有道提供：如实验室库存有符合条件抗体可提供使用，或也可代购。

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