一、包涵体的纯化和复性概述 包涵体折叠复性的方法应具备以下几个特点:较高的活性蛋白质回收率;复性产物易于与错误折叠蛋白质分离;折叠复性后能够得到较高浓度的蛋白;折叠复性方法易于放大等。蛋白复性的过程通...
包涵体蛋白常见问题解析
1.如何尽量避免蛋白表达过程中包涵体的形成?(1). 包涵体的形成很大一部分原因是蛋白表达过快引起的,那么降低诱导温度,例如25–30°C,或降低IPTG浓度(0.01–0.1mM)并延长诱导时间,或...
真菌基因编辑介绍
一、背景介绍:真菌是真核生物中一支庞大而种类繁多的物种,目前已知的约10万多种,自1996年酿酒酵母基因组被测定以来,越来越多的真菌基因组被解析和公布,测序获得大量功能未知的真菌DNA序列,鉴定这些基...
细菌同源重组改造菌株构建
一、背景介绍基因的同源重组是指外源 DNA 与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组,并整合在预定的位置上,从而改变细菌某些遗传特性的方法。细菌中基于同源重组的基因改造技术主要有Red/ET系统...
细菌CRISPR编辑株构建
一、背景介绍细菌是自然界中数量最多的一类生物,对细菌基因组进行改造,有助于我们理解病原菌的致病机理,耐药机制,清除耐药菌;改良工业菌株发酵,合成新的次级代谢产物,丰富生物原料等。我司拥有丰富的细菌突变...
荧光定量PCR技术简介
自从1983年K. Mullis发明聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)以来,PCR技术很快成为科研、临床诊断的热点技术。而实时荧光定量PCR技术,顾名思义,就...
双荧光素酶实验介绍
想验证miRNA与靶基因的作用? ——双萤光素酶报告基因检测想了解miRNA和lncRNA/circRNA的靶向互作?——双萤光素酶报告基因检测想知道转录因子对下游基因的作用? ——双萤光素酶报告基因...
ELISA检测项目介绍
一、ELISA实验原理:酶联免疫吸附测定( Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结...
杂交瘤制备单克隆抗体实验流程
利用杂交瘤制备单克隆抗体通常操作流程为:抗原制备、用抗原免疫动物、取免疫动物的脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞、对杂交瘤细胞进行筛选及克隆化、利用筛选得到的杂交瘤细胞进行单克隆抗体的大量生产。一、...
杂交瘤技术简介
杂交瘤技术又称为单克隆抗体技术:将免疫动物的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,可以得到既能产生抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞,利用杂交瘤细胞可以大量的生产单克隆抗体。一、产生背景:杂交瘤技术是在体细胞融合...
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