蛋白胶点胶条鉴定

蛋白胶点、胶条鉴定是目前使用最广泛的蛋白质组学研究手段,用双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE,Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)分离蛋白质混合物,收集目的蛋白质胶点和胶条,经胶内酶解后用于质谱分析以获得蛋白质信息。
采用LC-MS/MS技术进行蛋白胶点、胶条鉴定,并对胶内酶解法进行系列优化,显著提高了蛋白质胶内酶解的质谱鉴定成功率和肽段覆盖率。
一、技术特点:
(1)样品简单,容易检测;
(2)目标性强,易于分析;
(3)高准确性、高特异性、项目周期短。
 

蛋白胶点胶条鉴定

二、适用范围:
(1)目标蛋白鉴定;
(2)蛋白混合物鉴定;
(3)要求物种含有已完成全基因组测序或转录组测序注释的CDS信息,或目标蛋白序列已知。
 
三、实验流程:
(1)接受订单及样品;
(2)蛋白点切取;
(3)蛋白质酶解;
(4)LC-MS/MS;
(5)数据解析;
(6)结果交付。
 
四、样本要求:
需鉴定的样品(胶粒/条带、液体、干粉);
样品要求:
样品含量:50-1000fmol (根据检测项目而定);
②胶类样品:考染或银染(未使用戊二醛作为固定剂);
③保存方式:液体建议低温,胶类用去离子水防干;
④样品信息:需详细说明样品来源、含量、状态及其他基本信息。
 
五、结果交付:
实验报告一份,含实验流程、分析过程及数据结果。
 
六、实验周期:
自送样起25个工作日。
 

 

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martin
  • 本文由 发表于 2025年3月20日 11:41:45
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匿名

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