分子互作之核酸与核酸互作

2025年3月20日 11:44:05行业资料分子蛋白服务评论20阅读模式

miRNA可以与mRNA结合调节体内基因的表达，通过影响蛋白的表达、修饰、酶活性等来调节生命活动的进行。lncRNA作为体内的ceRNA，可以与miRNA结合起到调节基因表达的作用。研究lncRNA与miRNA的相互作用对于研究生命具有重要的意义。通过MS2-RIP和灵敏度更高的双荧光素酶技术，来研究lncRNA和miRNA的相互作用。

一、MS2-RIP：

MS2-RIP技术主要是应用针对GFP抗体的Protein G磁珠把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行q-PCR验证或者测序分析。

1.1实验流程：

（1）载体构建及转染；

（2）细胞裂解液获取及磁珠的准备；

（3）RNA结合蛋白免疫沉淀；

（4）RNA纯化；

（5）RNA反转录及cDNA验证；

（6）数据分析。

二、双荧光素酶报告系统：

双荧光素酶报告基因通常是一个报告基因作为内对照，使另一个报告基因的检测均一化。科沿有道应用Promega公司的双荧光素酶报告基因检测(DLR)系统，提供DLR检测服务。

2.1实验流程：